Хемилуминесцентният имуноанализ, CLIA е високочувствителна техника за имуноанализ.
1. Принцип
Хемилуминесцентният имуноанализ съчетава специфичността на имунния отговор и високата чувствителност на хемилуминесценцията. Основният му принцип е да комбинира специфичния имунен отговор между антиген и антитяло с хемилуминесцентна реакция. По-конкретно, антигенът в пробата, която ще се тества, се комбинира със специфично антитяло, за да образува имунен комплекс. След това, чрез поредица от химични реакции, имунният комплекс произвежда хемилуминесцентен сигнал. Интензитетът на луминесценция е пропорционален на концентрацията на антигена, който ще се тества, и съдържанието на антигена, който ще се тества, може да бъде количествено анализирано чрез откриване на интензитета на луминесценция.
2. Основни компоненти
Антитела: включително улавящи антитела и антитела за откриване. Антитялото за улавяне обикновено се фиксира върху твърдофазов носител, за да улови антигена, който ще се тества. Антитялото за откриване се комбинира с хемилуминесцентен маркер за откриване на антигена в имунния комплекс.
Твърдофазов носител: като микроплаки, магнитни перли и т.н., използвани за фиксиране на улавящото антитяло за улесняване на имунната реакция и отделяне и измиване.
Хемилуминесцентен маркер: обикновено вещество, което може да произведе луминесцентен сигнал при химическа реакция, като луминол, акридиниев естер и др. Маркерът се комбинира с антитялото за откриване, за да произведе хемилуминесцентен сигнал след имунната реакция.
Система за откриване: включително оборудване като луминесцентни детектори, които се използват за откриване на интензитета на хемилуминесцентни сигнали и преобразуването им в четими стойности.
3. Характеристики
Висока чувствителност: Може да открие изключително ниски концентрации на тестваното вещество, което обикновено е с няколко порядъка по-чувствително от традиционните методи за имуноанализ.
Широк линеен диапазон: Съдържанието на тестваното вещество може да бъде точно измерено в широк диапазон на концентрация без множество разреждания.
Силна специфичност: Въз основа на специфичното свързване на антиген и антитяло, той е силно селективен за специфични изпитвани вещества.
Бързо: Процесът на откриване е относително бърз и резултатите обикновено могат да бъдат получени за по-кратко време.
Висока степен на автоматизация: Подходящ е за откриване на мащабни проби и може да се използва заедно с автоматизирани инструменти за подобряване на ефективността на откриване.
4. Области на приложение
Клинична диагноза: Използва се за откриване на различни биомаркери, като туморни маркери, хормони, маркери за инфекциозни заболявания и т.н., за да осигури важна основа за диагностициране на заболяването, наблюдение на лечението и оценка на прогнозата.
Разработване на лекарства: Използва се за наблюдение на концентрацията на лекарства, оценка на ефикасността и изследване на метаболизма на лекарствата.
Тестове за безопасност на храните: Откриване на вредни вещества, остатъци от пестициди, остатъци от ветеринарни лекарства и др. в храните.
Мониторинг на околната среда: Откриване на замърсители и токсични вещества в околната среда.